更新时间:2026-02-22
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PCR技术的原理是在体外酶促扩增特定DNA片段的技术,类似于DNA的天然复制过程。
PCR技术是聚合酶链式反应技术的英文缩写,又称无细胞克隆技术,是以一种类似于天然DNA复制的方式,在体外扩增位于两段已知序列之间的DNA片段。它以拟扩增的DNA分子为模板,以一对分别与模板5′端和3′端互补的寡核苷酸为引物,在DNA聚合酶的作用下,按照半保留复制的机制沿着模板链延伸至完成新的DNA合成,不断地重复这一过程,即可使目的DNA片段以指数级进行扩增。引物与DNA片段的特异结合决定了扩增的特异性。其主要过程由变性、退火和延伸三个步骤反复循环组成,每循环一次,双链DNA分子数量即增加一倍。
自PCR技术问世以来,随着技术的推广和应用,衍生出了许多改良方法和技术。根据模板的不同、引物的特点以及是否与其他标记技术结合,可将PCR分为原位PCR、不对称PCR、逆转录PCR、反向PCR、定量PCR、多重PCR、巢式PCR、锚定PCR、重组PCR。